Разработка метода иммуноферментного анализа для детекции модифицированного эндолизина LysAm24-SMAP

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

В настоящее время модифицированные лизины бактериофагов широко исследуются в качестве активных субстанций противомикробных средств. В связи с этим становится актуальной разработка эффективных и точных методов измерения этих ферментов. Для детекции рекомбинантного модифицированного эндолизина LysAm24-SMAP в биологических образцах разработан метод иммуноферментного анализа (ИФА). Были подобраны оптимальные параметры для определения белка, в частности, изучено влияние соли и состава буферной системы для подготовки образцов для анализа. Показана применимость системы для иммунодетекции генно-инженерного эндолизина LysAm24-SMAP в различных биологических образцах при содержании в них фермента начиная от 0.4 нг/мл. Также, оценено влияние матричных эффектов образцов гомогенатов органов и тканей животных, лизатов штамма-продуцента и их отдельных компонентов при проведении анализа и показано, что наличие 0.65 М NaCl в ИФА-буфере в случае LysAm24-SMAP критично для получения корректных результатов и снижает неспецифические взаимодействия. Была подтверждена эффективность использования разработанной системы в иммунохимическом контроле бактериолитического фермента.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

А. А. Климова

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи Минздрава России; Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Минздрава России

Email: northernnatalia@gmail.com
Россия, Москва, 123098; Москва, 119991

И. В. Григорьев

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи Минздрава России

Email: northernnatalia@gmail.com
Россия, Москва, 123098

Д. В. Васина

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи Минздрава России

Email: northernnatalia@gmail.com
Россия, Москва, 123098

М. Н. Анурова

Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Минздрава России

Email: northernnatalia@gmail.com
Россия, Москва, 119991

В. А. Гущин

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи Минздрава России; Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова

Email: northernnatalia@gmail.com
Россия, Москва, 123098; Москва, 119991

Н. П. Антонова

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: northernnatalia@gmail.com
Россия, Москва, 123098

Список литературы

  1. Gerstmans H., Rodríguez-Rubio L., Lavigne R., Briers Y. // Biochem. Soc. Trans. 2016. V. 44. P. 123–128. https://doi.org/10.1042/BST20150192
  2. Love M.J., Bhandari D., Dobson R.C.J., Billington C. // Antibiotics (Basel). 2018. V. 7. № 1. 17. https://doi.org/10.3390/antibiotics7010017.
  3. Huemer M., Shambat S.M., Brugger S.D., Zinkernagel A.S. // EMBO Rep. 2020. e51034. https://doi.org/10.15252/embr.202051034
  4. Baquero F. // Int. Microbiol. 2021. V. 24. P. 499–506. https://doi.org/10.1007/s10123-021-00184-y
  5. Antonova N.P., Vasina D.V., Lendel A.M., Usachev E.V., Makarov V.V., Gintsburg A.L. et al. // Viruses. 2019. V. 11. № 3. https://doi.org/10.3390/v11030284
  6. Gutiérrez D., Briers Y. // Curr. Opin. Biotechnol. 2021. V. 68. P. 15–22. https://doi.org/10.1016/j.copbio.2020.08.014
  7. Fursov M.V., Abdrakhmanova R.O., Antonova N.P., Vasina D.V., Kolchanova A.D., Bashkina O.A. et al. // Viruses. 2020. V. 12. P. 545. https://doi.org/10.3390/v12050545
  8. Tabatabaei M.S., Ahmed M. // Methods Mol. Biol. 2022. 2508. P. 115–134. https://doi.org/10.1007/978-1-0716-2376-3_10
  9. Antonova N.P., Vasina D.V., Rubalsky E.O., Fursov M.V., Savinova A.S., Grigoriev I.V. et al. // Biomolecules. 2020. V. 10. P. 440. https://doi.org/10.3390/biom10030440
  10. Dawson R.M., Liu C.Q. // Drug Dev. Res. 2009. V. 70. P. 481–498.
  11. Vasina D.V., Antonova N.P., Grigoriev I.V., Yakimakha V.S., Lendel A.M., Nikiforova M.A. et al. // Front. Microbiol. 2021. V. 12. https://doi.org/10.3389/fmicb.2021.748718
  12. Arshinov I.R., Antonova N.P., Grigoriev I.V., Pochtovyi A.A., Tkachuk A.P., Gushchin V.A. et al. // Applied Biochemistry and Microbiology. 2022. V. 58. Suppl. 1. https://doi.org/10.1134/S0003683822100027
  13. Alves N.J. // Antib Ther. 2019. V. 2 P. 33–39. https://doi.org/10.1093/abt/tbz002
  14. Minas K., McEwan N.R., Newbold C.J., Scott K.P. // FEMS Microbiol. Lett. 2011. V. 325. P. 162–169. https://doi.org/10.1111/j.1574-6968.2011.02424.x
  15. Li G., Howard S.P. // Methods Mol. Biol. 2017. V. 1615. P. 143–149.
  16. Jun S.Y., Jung G.M., Yoon S.J., Youm S.Y., Han H.-Y., Lee J.-H. et al. // Clin Exp Pharmacol Physiol. 2016. V. 43. P. 1013–1016. https://doi.org/10.1111/1440-1681.12613
  17. Grishin A.V., Lavrova N.V., Lyashchuk A.M., Strukova N.V., Generalova M.S., Ryazanova A.V. et al. // Molecules. 2019. V. 24. https://doi.org/10.3390/molecules24101879
  18. Ross G.M. S., Filippini D., Nielen M.W.F., Salentijn G.I. // Anal. Chem. 2020. V. 92. P. 15587–15595. https://doi.org/10.1021/acs.analchem.0c03740
  19. Adhya S., Merril C. R., Biswas B. // Cold Spring Harb. Perspect Med. 2014. V. 4. https://doi.org/10.1101/cshperspect.a012518
  20. Höltje J.-V. // Arch. Microbiol. 1995. V. 164. P. 243–254. https://doi.org/10.1007/BF02529958
  21. Chen T., Rao, Y., Li J., Ren C., Tang D., Lin T. et al. // Int. J. Mol. Sci. 2020. V. 21. https://doi.org/10.3390/ijms21020501
  22. Callewaert L., Michiels C.W. // J. Biosci. 2010. V. 35. P. 127–160. https://doi.org/10.1007/s12038-010-0015-5
  23. Liu R., Meng Q., Dai Y., Zhang Y. // Chinese journal of biotechnology. V. 39. P. 4482–4496. https://doi.org/10.13345/j.cjb.230241
  24. Xu H., Lu J.R., Williams D.E. // J. Phys. Chem. B. 2006. V. 110. P. 1907–1914. https://doi.org/10.1021/jp0538161
  25. Generalova L.V., Grigoriev I.V., Vasina D.V., Tkachuk A.P., Kruzhkova I.S., Kolobukhina L.V. et al. // Bulletin of RSMU. 2022. V. 1. P. 14–21. https://doi.org/10.24075/brsmu.2022.005
  26. Gushchin V.A., Ogarkova D.A., Dolzhikova I.V., Zubkova O.V., Grigoriev I.V., Pochtovyi A.A. et al. // Front Immunol. 2022. V. 13. https://doi.org/10.3389/fimmu.2022.1023164
  27. Antonova N., Vasina D., Lendel A., Usachev E., Makarov V., Gintsburg A. et al. // Viruses. 2019. V. 11. https://doi.org/10.3390/v11030284
  28. Stiller J., Jasensky A.-K., Hennies M., Einspanier R., Kohn B. // J. Vet. Diagn. Invest. 2016. V. 3. P. 235–243. https://doi.org/10.1177/1040638716634397
  29. Biswas S., Saha M.K. // Immunochemistry & Immunopathology. 2015. V. 1. https://doi.org/10.4172/icoa.1000109

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Российская академия наук, 2024