DEPENDENCE OF NICKEL AND CADMIUM ACCUMULATION BY PLANTS ON THEIR CONCENTRATION

Full Text

Кадмий хорошо известен как элемент, токсичный для живых организмов уже при низких концентрациях (Azizian et al. 2011). Токсичность кадмия для растений проявляется в нарушении активности ферментов, торможении фотосинтеза, нарушении транспирации, а также ингибировании восстановления NО2 до NО (Khadijeh et al. 2011). Кроме того, в метаболизме растений он является антагонистом ряда элементов питания (Zn, Cu, Mn, Ni, Se, Ca, Mg, P) (Sharma, Dhiman 2013). При токсичном воздействии металла у растений наблюдаются задержка роста, повреждение корневой системы и хлороз листьев. Кадмий достаточно легко поступает из почвы и атмосферы в растения. По фитотоксичности и способности накапливаться в растениях в ряду тяжелых металлов он занимает первое место (Swain et al. 2014). Биологическая роль никеля заключается в участии в структурной организации и функционировании основных клеточных компонентов - ДНК, РНК и белка. Наряду с этим он присутствует и в гормональной регуляции организма. По своим биохимическим свойствам никель весьма схож с железом и кобальтом. До настоящего времени в литературе не встречаются данные о дефиците никеля для растений, однако в ряде экспериментов установлено положительное влияние внесения никеля в почвы на урожайность сельскохозяйственных культур, которое, возможно, связано с тем, что он стимулирует микробиологические процессы нитрификации и минерализации соединений азота в почвах (Di Salvatore 2012). Токсичность никеля для растений проявляется в подавлении процессов фотосинтеза и транспирации, появлении признаков хлороза листьев (Syama et al. 2016). Целью данной работы является установление зависимости аккумуляции растениями никеля и кадмия от их концентрации. В процессе исследования семена растений, названия которых приведены в таблице 1, проращивались в чашках Петри на песке в течение 4-7 дней. Затем пророщенные семена перемещались на сетку, укрепленную на горловине сосуда объемом 1 л. Сосуд заполнялся раствором Хоагланда (Watson et al. 2003), в состав которого входят соли Ca(NO3)2Ÿ4H2O, KNO3, Fe-EDTA, MgSO4Ÿ7H2O, KH2PO4. Для данной серии экспериментов использовался раствор, разбавленный в 4 раза по сравнению с оригинальной рецептурой (1/4-strength modified). Через 2 недели в раствор Хоагланда вводились добавки разных концентраций никеля и кадмия (см. табл. 2). Там же показано отношение концентрации металла в растворе к значению предельно допустимой концентрации (ПДК) для водоемов хозяйственно-питьевого (ПДКх.п.в.) и рыбохозяйственного (ПДКр.х.) назначения. Таблица 1 Перечень семян, использованных в исследованиях Растение Видовое название (Николаева, Паутова 2002) Сорта Условное обозначение Редис Raphanus sativus L. French breakfast FB Cherry belle CB Long white icicle LWI Mixed M Кукуруза Zea maysL. F1 Sweet nugget SN F1 Kelvedon glory KG Таблица 2 Характеристика растворов никеля и кадмия Ср-р, mM Никель Кадмий Ср-р, мг/л Ср-р, мг/л 1 0,06 0,6 6 0,11 110 22 2 0,12 1,2 12 0,23 230 46 5 0,29 3 29 0,56 560 112 10 0,59 6 59 1,12 1120 224 20 1,17 12 117 2,25 2250 450 Растения выращивались в теплице при температуре 25-27 0С, которая соответствует среднемноголетней температуре летнего сезона на территории Башкортостана (Afanasev et al. 2014). Через 3 недели растения удалялись из раствора. Корни отделялись от зеленой массы, промывались и сушились в сушильной печи в течение суток при температуре 70 0C, затем взвешивались. По результатам взвешивания рассчитывался индекс толерантности для побегов (ИТП), корней (ИТК) и всей биомассы исследуемых растений (ИТБ) (табл. 3, 4). Таблица 3 Порядок расчета индекса толерантности растения к воздействию тяжелых металлов (Ismail 2013) Формула Градация Индекс толерантности: , где - вес сухой биомассы растения, выращенного с добавлением металлов, г; - вес сухой биомассы контрольного растения, выращенного в растворе Хоагланда, г. Индекс толерантности рассчитывается для побегов (ИТП), корней (ИТК) и всей биомассы в целом (ИТБ). ИТ>100% - стимулирующее воздействие; ИТ = 100% - отсутствие влияния; ИТ<100% - угнетающее влияние анализируемых концентраций тяжелых металлов на рост растения; ИТ = 50% - минимальный желательный объем биомассы при произрастании на загрязненной среде. Затем высушенные растения измельчалась в настольной мельнице (Glen Creston hammer cutter mill, England) с 1,5 мм сеткой. Измельченная биомасса растений подвергалась кислотной минерализации. Навеска биомассы 0,2-0,5 г минерализовалась в 10 мл 69% азотной кислоты и после выдерживания при комнатной температуре в течение 12 часов помещалась в блок разложения на 3 часа при температуре 120 °C (до прекращения выделения оксидов азота). После окончания процесса минерализации и охлаждения пробирок в них добавлялось 10 мл дистиллированной воды, после чего содержимое отфильтровывалось через фильтровальную бумагу № 541 (соответствует отечественной фильтровальной бумаге с синей лентой) в мерные колбы, осадок на фильтре промывался дистиллированной водой, и объем раствора доводился до 50 мл. Полученные пробы переливались в 60-мл пластиковые бутылки. Содержание металлов определялось с помощью метода пламенной атомно-абсорбционной спектрометрии (ААС). Сравнение полученных значений индекса толерантности (табл. 4) с внешним видом растений (рис. 1, 2) показало, что значение ИТБ>100% не свидетельствует о стимулирующем действии металлов на рост растений. Об этом свидетельствуют их угнетенный вид и наличие хлорозных и некрозных пятен на листьях. Часть биомассы представляла собой растительную массу с нарушением нормальной деятельности метаболических центров и течения метаболических процессов. Был проведен корреляционный анализ для установления тесноты связи между концентрацией металлов в растворе и в различных частях растений (рис. 3, табл. 5). Величина коэффициента корреляции варьировалась от 0,73 до 0,99, что соответствует тесной (0,71÷0,9) и очень тесной линейной связи (0,91 и выше) (Трухачева 2012). Анализ зависимости концентраций металлов в растениях и в растворе показал, что для аккумуляции как никеля, так и кадмия редисом FB и кукурузой SN (аккумуляция никеля - только корнями) характерна линейная зависимость. Установлено, что кукуруза SN вообще не накапливает никель в надземных частях растения во всем исследованном диапазоне концентраций. Анализ корреляции между концентрациями металлов в растворе и индексом толерантности растений показал, что тесной корреляционной зависимостью характеризуется только ИТБ редиса от концентрации никеля в растворе (r=0,92), в остальных случаях зависимость была слабой и имела обратный характер. Таблица 4 Индекс толерантности,% Концентрация металла в растворе Кукуруза SN Редис FB Ni Cd Ni Cd ИТП ИТК ИТБ ИТП ИТК ИТБ ИТП ИТК ИТПл ИТБ ИТП ИТК ИТПл ИТБ 1 µM 181 145 172 148 155 149 88 88 143 117 85 88 117 102 2 µM 118 123 119 109 98 106 85 63 161 124 112 100 184 150 5 µM 84 68 80 74 70 73 97 88 140 119 144 63 217 178 10 µM 90 70 85 73 68 72 122 100 160 141 108 75 173 141 20 µM 84 68 80 58 58 58 119 88 179 149 63 88 129 99 Таблица 5 Концентрация металлов в сладкой кукурузе SN, мг Me/кг сухой массы Концентрация металла в растворе Кукуруза SN Редис FB Ni Cd Ni Cd Побеги Корни Побеги Корни Побеги Плоды Корни Побеги Плоды Корни 1 µM нпо 4,9 12,0 47,3 3,23 9,97 - 6,1 нпо 70,72 2 µM нпо 16,3 41,3 146,1 14,05 23,7 - 31,8 17,78 171,6 5 µM нпо 100,7 100,1 319,9 21,3 34,8 78,61 40,1 30,92 569,43 10 µM нпо 359,9 128,1 441,4 84,9 95,1 146,53 219,2 112,10 792,93 20 µM нпо 544,1 133,8 752,1 209,8 387,6 1000 504,4 231,12 2073,55 Полученные результаты подтверждают данные о возможности извлечения кадмия и никеля из сточных вод с помощью ризофильтрации путем пропускания сточных вод через установки с высшими наземными растениями, выращиваемыми гидропонным методом, т.к. их длинная, волокнистая и густая, покрытая волосками, корневая система способна абсорбировать, концентрировать или осаждать тяжелые металлы (Januarya et al. 2008). Анализ результатов проверки соответствия концентраций в исследуемых растениях критерию безопасности (Елизарьев и др. 2015) показал, что кукуруза SN может быть использована для ризофильтрации сточных вод, содержащих никель в пределах 1÷20 µM с последующим применением биомассы как на корм скоту, так и в пищу человеку (табл. 6). В случае с кадмием, биомасса кукурузы SN не пригодна для этих целей. Редис FB накапливает тяжелые металлы в количествах, не превышающих допустимых норм, лишь при минимальных концентрациях кадмия (1µM) и никеля (1÷2µM). Таблица 6 Соотношение концентраций никеля и кадмия в сырой биомассе с МДУ их содержания в корме скота (Починова 2014) и с ПДК в пище человека (СанПиН 2.1.7.573-96) Концентрация металла в растворе Кукуруза SN Редис FB Ni Cd Ni Cd МДУ ПДКп.п. МДУ ПДКп.п. МДУ ПДКп.п. МДУ ПДКп.п. 1 µM 0,12* 0,02* 5 47 0,2 1 1,2* 1,2* 2 µM 0,12* 0,02* 16 162 0,6 3 42 42 5 µM 0,12* 0,02* 39 393 0,8 5 74 74 10 µM 0,12* 0,02* 50 502 2 14 267 267 20 µM 0,12* 0,02* 52 525 9 55 550 550 Примечание. * - рассчитаны по значению предела обнаружения (0,5 мг / кг сухой массы). Таким образом, согласно полученным данным кадмий является высокотоксичным элементом даже при невысоком его содержании и характеризуется интенсивным перемещением внутри растения. Токсичность никеля и его транслокация сильно зависят от вида растения. Выявленные тенденции накопления ионов кадмия и никеля в различных частях растений можно использовать для доочистки сточных вод ризофильтрацией с последующим применением выращенной биомассы как на корм скоту, так и в пищу человеку в зависимости от вида растения и концентрации тяжелых металлов в сточных водах. Рис. 1. Кукуруза SN, выращенная в растворе, содержащем разные концентрации Cd и Ni Рис. 2. Редис CB, выращенный в растворе, содержащем разные концентрации Cd и Ni Рис. 3. Зависимость концентрации металлов в растениях от их концентрации в растворе

About the authors

E. N. Elizareva

Bashkir state university

Candidate of Technical Science (PhD), Assistant Professor at the Department of Life Safety and Environmental Protection

Y. A. Yanbaev

Bashkir state university

Doctor of Biological Science (Grand PhD), Professor at the Department of Life Safety and Environmental Protection

A. Y. Kulagin

Ufa Institute of Biology of the Russian Academy Sciences

Doctor of Biological Science (Grand PhD), Professor, Head of Laboratory of Forestry

I. Y. Usmanov

Nizhnevartovsk State University

Doctor of Biological Science (Grand PhD), Professor at the Department of Ecology

References

Supplementary files