Perm Medical JournalPerm Medical JournalПермский медицинский журнал (сетевое издание "Perm medical journal")0136-14492687-1408Eco-Vector314510.17816/pmj30682-86ArticlesСтатьиResearch ArticleASSESSMENT OF BUFFERED FORMALIN EFFECT ON ALKALINE PHOSPHATASE ACTIVITY BY MEANS OF ELECTROCHEMICAL METHODОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ЗАБУФЕРЕННОГО ФОРМАЛИНА НА АКТИВНОСТЬ ЩЕЛОЧНОЙ ФОСФАТАЗЫ С ПОМОЩЬЮ ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКОГО МЕТОДАOfirKОфирКармит

аспирант кафедры электронных систем

BelkinA NБелкинАнтон Николаевич

аспирант кафедры патологической анатомии с секционным курсом

belkinanton87@gmail.comFreindG GФрейндГенриетта Герхардовна

д.м.н., профессор, заведующая кафедрой патологической анатомии с секционным курсом

KatsnelsonM DКацнельсонМихаил Давидович

профессор кафедры металлорежущих станков и инструментов

DergachevVДергачевВладимир

аспирант кафедры молекулярной биологии и биотехнологии

LitsinS NЛицынСемен Натанович

профессор кафедры электронных систем

Sheham-DiamandYШэхам-ДиамандЙоси

профессор, заведующий кафедрой физической электроники

ChetvertnykhV AЧетвертныхВиктор Алексеевич

д.м.н., профессор, заведующий кафедрой цитологии, гистологии и эмбриологии

KrotovL NКротовЛев Николаевич

доктор физических наук, профессор кафедры прикладной физики

Тель-Авивский Университет, Тель-Авив, ИзраильПермская государственная медицинская академия им. ак. Е. А. ВагнераПермский национальный исследовательский политехнический университет, г. Пермь, Россия15122013306VOL 30, NO6 (2013)ТОМ 30, №6 (2013)828612072016Copyright ©; 2013, Ofir K., Belkin A.N., Freind G.G., Katsnelson M.D., Dergachev V., Litsin S.N., Sheham-Diamand Y., Chetvertnykh V.A., Krotov L.N.Copyright ©; 2013, Офир К., Белкин А.Н., Фрейнд Г.Г., Кацнельсон М.Д., Дергачев В., Лицын С.Н., Шэхам-Диаманд Й., Четвертных В.А., Кротов Л.Н.2013Ofir K., Belkin A.N., Freind G.G., Katsnelson M.D., Dergachev V., Litsin S.N., Sheham-Diamand Y., Chetvertnykh V.A., Krotov L.N.Офир К., Белкин А.Н., Фрейнд Г.Г., Кацнельсон М.Д., Дергачев В., Лицын С.Н., Шэхам-Диаманд Й., Четвертных В.А., Кротов Л.Н.http://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0https://permmedjournal.ru/PMJ/article/view/3145

Aim. To assess the effect of formalin on the activity of alkaline phosphatase in vitro using electrochemical method. Materials and methods. The method based on assessment of alkaline phosphatase activity by its substrate decay products (1-naphthyl phosphate) possessing electrochemical activity was developed. Alkaline phosphatase solution samples were mixed with buffered formalin (10% concentration) in the ratio of 50:50 and stored during 10–240 minutes at the room temperature. Alkaline phosphatase samples free of formalin served as the control. Then, chronoamperometric measurement of enzyme activity after addition of substrate (1-naphthyl phosphate) was performed. Results. It was established that alkaline phosphatase activity is significantly reduced already in 2 hours after its contact with buffered formalin. Conclusion. It is recommended to determine AP activity in nonfixed biological tissues or in 10% neutral formalin fixed tissues for not more than two hours.

Цель. Оценить влияние формалина на активность ЩФ in vitro с помощью электрохимического метода. Материалы и методы. Разработан метод, основанный на оценке активности щелочной фосфатазы по продуктам распада субстрата (1-нафтил-фосфата), который обладают электрохимической активностью. Смешивали образцы растворов щелочной фосфатазы с забуференным формалином (концентрация 10%) в соотношении 50:50 и держали их от 10 до 240 минут при комнатной температуре. Контролем служили образцы щелочной фосфатазы без добавления формалина. Затем проводили хроноамперометрическое измерение активности фермента после добавления субстрата (1-нафтил фосфат). Результаты. Установлено, что активность щелочной фосфатазы значительно снижается уже через 2 часа после контакта с забуференным формалином. Выводы. Это подтверждает, что целесообразно определять активность ЩФ в нефиксированных биологических тканях или при их фиксации в 10%-ном нейтральном формалине в течение не более двух часов.

Alkaline phosphataseformalinchronoamperometryЩелочная фосфатазаформалинхроноамперометрияВерник С., Белкин А. Н., Фрейнд Г. Г., Кацнельсон М. Д., Шахам-Диаманд Й., Лицын С. Н., Четвертных В. А. Морфологическое обоснование возможности использования электрохимических биосенсоров в диагностике колоректального рака. Пермский медицинский журнал 2012; 5: 5–7.Гайер Г. Электронная гистохимия: пер. с нем. И. Б. Бухвалова. М.: Мир, 1974; 458.Christudoss P., Selvakumar R., Pulimood A. B., Fleming J. J., Mathew G. Zinc and zinc related enzymes in precancerous and cancerous tissue in the colon of dimethyl hydrazine treated rats. Asian Pacific Journal of cancer prevention 2012; 13: 487–492.Feustel E.-M., Gayer G. Zureingung der acroleinfixierung fur histochemiche. Acta Histochemistry 1966; 25: 219–233.Fox C. H., Johnson F. B., Whiting J., Roller P. P. Formaldehyde fixation. Journal of Histochemistry&Cytochemistry 1985; 33 (8): 845–853.Goosen N. K., Broers C. A., Hombergen E.-J., Stumm C. K., Vogels G. D. Effect of fixation on activity and cytochemistry of hydrogenosomal enzymes in Trichomonasvaginalis. Journal of General Microbiology 1990; 136: 2189–2193.Hoopwood D. Some aspects of fixation with glutaraldehyde. A biochemical and histochemical comparison of the effects of formaldehyde and glutaraldehyde fixation on various enzymes and glycogen, with a note on penetration of glutaraldehyde into liver. Journal of anatomy 1967; 101: 83–92.Puchtler H., Meloan S. N. On the chemistry of formaldehyde fixation and its effects on immunohistochemical reactions. Histochemistry 1985; 82 (3): 201–204.Tsai C. Y., Chen Y. H., Chien Y. W., Huang W. H., Lin S. H. Effect of soy saponin on the growth of human colon cancer cells. World Journal of Gastroenterology 2010; 16 (27): 3371–3376.Verhaert P., WalgraeveH., Downer R. Alkaline phosphatase activity in the brain of the American cockroach Periplaneta AmericanaL. The Histochemical Journal 1990; 22 (11): 628–635.Wang Q., Zhou Y., Rychahou P., Liu C., Weiss H. L., Evers B. M. NFAT5 represses canonical Wntsignaling via inhibition of β–catenin acetylation and participates in regulating intestinal cell differentiation. Cell Death and Disease 2013; 4: 671.