Perm Medical JournalPerm Medical JournalПермский медицинский журнал (сетевое издание "Perm medical journal")0136-14492687-1408Eco-Vector62587410.17816/pmj406135-147Biology and experimental medicineБиология и экспериментальная медицинаResearch ArticleEffect of peptides of trophoblastic Β1 glycoprotein on peripheral and local T-regulatory lymphocytes level in Wistar rats with allogeneous bone marrow cell transplantationВлияние пептидов трофобластического Β1-гликопротеина на уровень периферических и локальных Т-регуляторных лимфоцитов у крыс wistar при аллогенной трансплантации клеток костного мозгаhttps://orcid.org/0000-0002-6474-1487ZamorinaS. А.ЗаморинаС. А.
Russian Federation

Doctor of Biological Sciences, Leading Researcher, of the Laboratory of Cellular Immunology and Biotechnology, Professor of the Department of Microbiology and Immunology

доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клеточной иммунологии и биотехнологии, профессор кафедры микробиологии и иммунологии

zamorina.sa@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-5784-6224BochkovaМ. S.БочковаМ. С.
Russian Federation

Candidate of Biological Sciences, Researcher of the Laboratory of Cellular Immunology and Biotechnology, Senior Lecturer of the Department of Microbiology and Immunology

кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории клеточной иммунологии и биотехнологии, старший преподаватель кафедры микробиологии и иммунологии

zamorina.sa@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0003-4581-1969TimganovaV. P.ТимгановаВ. П.
Russian Federation

Candidate of Biological Sciences, Researcher of the Laboratory of Cellular Immunology and Biotechnology

кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории клеточной иммунологии и биотехнологии

zamorina.sa@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-1656-7277VlasovaV. V.ВласоваВ. В.
Russian Federation

junior researcher, Laboratory of Molecular Immunology, engineer of the Department of Microbiology and Immunology

младший научный сотрудник лаборатории молекулярной иммунологии, инженер кафедры микробиологии и иммунологии

zamorina.sa@gmail.comhttps://orcid.org/0009-0002-8732-4210LyubimovА. V.ЛюбимовА. В.
Russian Federation

MD, PhD, Professor, consultant

доктор биологических наук, профессор, консультант

zamorina.sa@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-8597-2682LoginovaN. P.ЛогиноваН. П.
Russian Federation

MD, PhD, Associate Professor, Head of the Department of Histology, Embryology and Cytology

доктор медицинских наук, доцент, заведующая кафедрой гистологии, эмбриологии и цитологии

zamorina.sa@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-2193-7463CharushinaYu. A.ЧарушинаЮ. A.
Russian Federation

Lecturer, Department of Histology, Embryology and Cytology

преподаватель кафедры гистологии, эмбриологии и цитологии

zamorina.sa@gmail.comhttps://orcid.org/0009-0006-0228-0896ChemurzievaN. V.ЧемурзиеваН. В.
Russian Federation

Candidate of Biological Sciences, Head of the Department of Educational, Methodological and Scientific Support

кандидат биологических наук, начальник отдела учебно-методического и научного обеспечения

zamorina.sa@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-6882-4928RayevМ. B.РаевМ. Б.
Russian Federation

Doctor of Biological Sciences, Head of the Laboratory of Cellular Immunology and Nanobiotechnology, Professor of the Department of Microbiology and Immunology

доктор биологических наук, заведующий лаборатории клеточной иммунологии и нанобиотехнологии, профессор кафедры микробиологии и иммунологии

zamorina.sa@gmail.comPerm State National Research UniversityПермский государственный национальный исследовательский университетInstitute of Ecology and Genetics of Microorganisms, Ural Branch of RASИнститут экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук – филиал Пермского федерального исследовательского центра Уральского отделения Российской академии наукPerm State National Research UniversityИнститут экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук – филиал Пермского федерального исследовательского центра Уральского отделения Российской академии наукInstitute of Ecology and Genetics of Microorganisms, Ural Branch of RASPerm State National Research UniversityПермский государственный национальный исследовательский университетInstitute of Ecology and Genetics of Microorganisms, Ural Branch of RASИнститут экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук – филиал Пермского федерального исследовательского центра Уральского отделения Российской академии наукООО «Имбиоком»“Imbiocom” LLCПермский государственный медицинский университет имени академика Е.А. ВагнераE.A. Vagner Perm State Medical UniversityПермский государственный медицинский университет имени академика Е.А. ВагнераE.A. Vagner Perm State Medical UniversityПермский государственный национальный исследовательский университетInstitute of Ecology and Genetics of Microorganisms, Ural Branch of RAS201220234061351472201202422012024Copyright ©; 2023, Eco-VectorCopyright ©; 2023, Эко-Вектор2023Eco-VectorЭко-Векторhttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/https://permmedjournal.ru/PMJ/article/view/625874

Objective. The range of peptide drugs is expanding, but no drug with immunosuppressive activity has yet been found. Considering the fact that the trophoblastic β1-glycoprotein (PSG) is a fetoplacental protein with immunosuppressive activity, short peptide fragments of this protein were studied in the formation of an immune response in a situation of allogeneic cell transplantation. To study the effect of PSG peptides (YECE, YQCE, YVCS, and YACS) on the levels of peripheral and local T-regulatory cells (Treg) during the formation of an immune response to the introduction of allogeneic bone marrow cells (BM) in a dynamic experiment on Wistar rats.

Materials and methods. We used an original host-versus-graft model in male Wistar rats without preconditioning of recipients. Animals were injected with PSG peptide fragment composition against a background of allogeneic intraperitoneal transplantation of BM cells in a dynamic experiment, in which the following parameters were evaluated: the level of peripheral "true" Tregs (CD4+CD25+FOXP3+), CD4+CD25-FOXP3+ cells, and FOXP3 expression in mesenteric lymph nodes. Material was collected on days 3 and 21 of the experiment.

Results. PSG peptide administration against a background of allogeneic BM cells was found to reduce the absolute and relative amount of Treg in the peripheral blood of rats on days 3 and 21 of the experiment. PSG peptides against the background of the introduction of allogeneic BM cells reduced the absolute and relative amounts of CD4+CD25-FOXP3+ cells on the day 3 of the experiment. The introduction of PSG peptides against the background of the introduction of BM cells resulted in a relative decrease in FOXP3 expression in the T zone of mesenteric lymph nodes on the day 21 of the experiment.

Conclusions. Thus, the PSG peptides did not have the expected effect on the level of peripheral and local Treg cells; moreover, the presence of the peptides led to a decrease in the number of these cells.

Цель. Сфера применения пептидных препаратов быстро расширяется, однако до сих пор не найден препарат с иммуносупрессорной активностью. Учитывая тот факт, что трофобластический β1-гликопротеин (ТБГ) является фетоплацентарным белком с иммуносупрессорной активностью, изучали короткие пептидные фрагменты этого белка в формировании иммунного ответа в ситуации трансплантации аллогенных клеток. Изучено влияние пептидов ТБГ (YECE, YQCE, YVCS и YACS) на уровень периферических и локальных Т-регуляторных клеток (Treg) в процессе формировании иммунного ответа на введение аллогенных клеток костного мозга (КМ) в динамическом эксперименте на крысах Wistar.

Материалы и методы. В работе использовали оригинальную модель реакции «хозяин против трансплантата» на крысах-самцах Wistar без предварительного кондиционирования у реципиентов. Животным вводили композицию пептидных фрагментов ТБГ на фоне аллогенной внутрибрюшинной трансплантации клеток КМ в динамическом эксперименте, оценивая следующие параметры: уровень периферических «истинных» Treg (CD4+CD25+FOXP3+), CD4+CD25-FOXP3+-клеток и экспрессию FOXP3 в брыжеечных лимфатических узлах. Материал забирали на 3-и и 21-е сутки эксперимента.

Результаты. Показано, что введение пептидов ТБГ на фоне введения аллогенных клеток КМ снижало абсолютное и относительное количество Treg в периферической крови крыс на 3-и и 21-е сутки эксперимента. Пептиды ТБГ на фоне введения аллогенных клеток КМ снижали абсолютный и относительный уровень CD4+CD25–FOXP3+ клеток на 3-и сутки эксперимента. Введение пептидов ТБГ на фоне введения клеток КМ приводило к относительному снижению экспрессии FOXP3 в Т-зоне брыжеечных лимфатических узлов на 21-е сутки эксперимента.

Выводы. Таким образом, пептиды ТБГ не оказывали ожидаемого воздействия на уровень периферических и локальных Treg, более того, присутствие пептидов приводило с снижению количества этих клеток.

peptidespregnancy-specific beta 1-glycoproteinsYACSYQCEYVCSYECEallograftsregulatory T-CellsFOXP3Wistar ratsкороткие пептидные фрагментытрофобластический β1-гликопротеинYACSYQCEYVCSYECEаллогенный трансплантатТ-регуляторные лимфоцитыFOXP3крысы WistarWang L., Wang N., Zhang W. Cheng X., Yan Z., Shao G., Wang X., Wang R. Therapeutic peptides: current applications and future directions. Sig Transduct Target Ther. 2022; 7: A48. doi.org/10.1038/s41392-022-00904-4Wang L., Wang N., Zhang W. Cheng X., Yan Z., Shao G., Wang X., Wang R. Therapeutic peptides: current applications and future directions. Sig Transduct Target Ther. 2022; 7: A48. DOI: 10.1038/s41392-022-00904-4Apostolopoulos V., Bojarska J., Chai T.T., Elnagdy S., Kaczmarek K., Matsoukas J., New R., Parang K. et al. A Global Review on Short Peptides: Frontiers and Perspectives. Molecules. 2021; 26 (2): 430. DOI: 10.3390/molecules26020430.Apostolopoulos V., Bojarska J., Chai T.T., Elnagdy S., Kaczmarek K., Matsoukas J., New R., Parang K. et al. A Global Review on Short Peptides: Frontiers and Perspectives. Molecules 2021; 26 (2): 430. DOI: 10.3390/molecules26020430.Moldogazieva N.T., Mokhosoev I.M., Terentiev A.A. Pregnancy-specifi c β1-glycoproteins: combined biomarker roles, structure/function relationships and implications for drug design. Curr. Med. Chem. 2017; 3 (24): 245–267. DOI: 10.2174/092986732466 6161123090554Fedoreeva L.I., Kireev I.I., Havinson V.H., Vanyushin B.F. Proniknovenie korotkih fluorescentno-mechennyh peptidov v yadro v kletkah HeLa i specificheskoe vzaimodejstvie peptidov s dezoksiribooligonukleotidami i DNK in vitro. Biohimiya 2011; 76 (11): 1505–1516 (in Russian).Федореева Л.И., Киреев И.И., Хавинсон В.Х., Ванюшин Б.Ф. Проникновение коротких флуоресцентно-меченных пептидов в ядро в клетках HeLa и специфическое взаимодействие пептидов с дезоксирибоолигонуклеотидами и ДНК in vitro. Биохимия 2011; 76 (11): 1505–1516.Hori S. FOXP3 as a master regulator of Treg cells. Nat. Rev. Immunol. 2021; 21: 618–619. doi.org/10.1038/s41577-021-00598-9Hori S. FOXP3 as a master regulator of Treg cells. Nat. Rev. Immunol. 2021; 21: 618–619. DOI: 10.1038/s41577-021-00598-9Rodríguez-Perea A.L., Arcia E.D., Rueda C.M., Velilla P.A. Phenotypical characterization of regulatory T cells in humans and rodents. Clin. Exp. Immunol. 2016; 185 (3): 281–91. DOI: 10.1111/cei.12804.Sakaguchi S., Yamaguchi T., Nomura T., Ono M. 2008. Regulatory T cells and immune tolerance. Cell. 2008; 133: 775–787. DOI: 10.1016/j.cell.2008.05.009.Korsunskij I.A., Rumyancev A.G., Bykovskaya S.N. Rol' regulyatornyh T-kletok CD4+CD25+ i mezenhimal'nyh stvolovyh kletok kostnogo mozga v podavlenii reakcii transplantat protiv hozyaina. Onkogematologiya 2008; 3: 45–51 (in Russian).Корсунский И.А., Румянцев А.Г., Быковская С.Н. Роль регуляторных Т-клеток CD4+CD25+ и мезенхимальных стволовых клеток костного мозга в подавлении реакции трансплантат против хозяина. Онкогематология 2008; 3: 45–51.Hardt F., Claësson M.H. Graft-versus-host reactions mediated by spleen cells from amyloidotic and nonamyloidotic mice. Transplantation. 1971; 12: 36–39. DOI: 10.1097/00007890-197107000-00005Hardt F., Claësson M.H. Graft-versus-host reactions mediated by spleen cells from amyloidotic and nonamyloidotic mice. Transplantation 1971; 12: 36–39. DOI: 10.1097/ 00007890-197107000-00005Timganova V.P., Bochkova M.S., SHardina K.YU., Uzhviyuk S.V., Gutina E.V., Raev M.B., Lyubimov A.V., Zamorina S.A. Vliyanie korotkih peptidnyh fragmentov TBG na citokinovyj profil' krys Wistar pri allogennoj transplantacii v eksperimente in vivo. Medicinskaya immunologiya 2022; 24 (3): 491–506. DOI: 10.15789/1563-0625-EOS-2472 (in Russian).Тимганова В.П., Бочкова М.С., Шардина К.Ю., Ужвиюк С.В., Гутина Е.В., Раев М.Б., Любимов А.В., Заморина С.А. Влияние коротких пептидных фрагментов ТБГ на цитокиновый профиль крыс Wistar при аллогенной трансплантации в эксперименте in vivo. Медицинская иммунология 2022: 24 (3): 491–506. DOI: 10.15789/1563-0625-EOS-2472Sellaro T.L., Filkins R., Hoffman C., Fine J.L., Ho J., Parwani A.V., Pantanowitz L., Montalto M. Relationship between magnification and resolution in digital pathology systems. J. Pathol. Inform. 2013; 4: 21. DOI: 10.4103/ 2153-3539.116866.Liu X., Wang X., Ding J., Gao Y., Zhao Y., Zhao R., Sun Q., Zhang S. FOXP3 and CD25 double staining antibody cocktails identify regulatory T cells in different types of tumor tissues using tissue microarrays. Ann Diagn Pathol. 2019; 38: 67–70. DOI: 10.1016/j.anndiagpath.2018.11.005.Martin-Moreno PL., Tripathi S., Chandraker A. Regulatory T Cells and Kidney Transplantation. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2018; 13 (11): 1760–1764. doi.org/10.2215/CJN.01750218.Martin-Moreno PL., Tripathi S., Chandraker A. Regulatory T Cells and Kidney Transplantation. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2018; 13 (11): 1760–1764. DOI: 10.2215/CJN.01750218.Zohouri M., Mehdipour F., Razmkhah M., Faghih Z., Ghaderi A. CD4+CD25-FoxP3+ T cells: a distinct subset or a heterogeneous population? Int. Rev. Immunol. 2021; 40 (4): 307–316. DOI: 10.1080/08830185.2020.1797005Willard-Mack C.L. Normal Structure, Function, and Histology of Lymph Nodes. Toxicologic Pathology 2006; 34 (5): 409–424. DOI: 10.1080/01926230600867727Ochando J.C., Yopp A.C., Yang Y., Garin A., Li Y., Boros P., Llodra J., Ding Y., Lira S.A., Krieger N.R., Bromberg J.S. Lymph node occupancy is required for the peripheral development of alloantigen-specific Foxp3+ regulatory T cells. J Immunol. 2005; 174 (11): 6993–7005. DOI: 10.4049/jimmunol.174.11.6993.Bochkova M.C., Timganova V.P., Uzhviyuk S.V., Gutina E.V., Raev M.B., Lyubimov A.V., Zamorina S.A. Vliyanie korotkih peptidov TBG na markery vospaleniya pri allogennoj transplantacii kletok kostnogo mozga u krys Vistar. Byulleten' eksperimental'noj biologii i mediciny 2023; 175 (5): 591–596. DOI: 10.47056/0365-9615-2023-175-5-591-596 (in Russian).Бочкова М.C., Тимганова В.П., Ужвиюк С.В., Гутина Е.В., Раев М.Б., Любимов А.В., Заморина С.А. Влияние коротких пептидов ТБГ на маркеры воспаления при аллогенной трансплантации клеток костного мозга у крыс Вистар. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2023; 175 (5): 591–596. DOI: 10.47056/0365-9615-2023-175-5-591-596.Jones K., Bryant S., Luo J., Kiesler P., Koontz S., Warren J., Malech H., Kang E., Dveksler G. Recombinant Pregnancy-Specific Glycoprotein 1 Has a Protective Role in a Murine Model of Acute Graft-versus-Host Disease. Biol Blood Marrow Transplant. 2019; 25 (2): 193–203. DOI: 10.1016/j.bbmt.2018.09.022.