Production of Soluble Human Gamma Interferon in the  Escherichia coli  Expression System with a Decrease in Cultivation Temperature

E. A. Volosnikova; Волосникова Е. А.; T. I. Esina; Есина Т. И.; D. N. Shcherbakov; Щербаков Д. Н.; N. V. Volkova; Волкова Н. В.; Ya. S. Gogina; Гогина Я. С.; T. A. Tereshchenko; Терещенко Т. А.; E. D. Danilenko; Даниленко Е. Д.

doi:10.31857/S0555109923020174

Получение растворимого интерферона гамма человека в системе экспрессии Escherichia coli при снижении температуры культивирования

Авторы: Волосникова Е.А.¹, Есина Т.И.¹, Щербаков Д.Н.¹, Волкова Н.В.¹, Гогина Я.С.¹, Терещенко Т.А.¹, Даниленко Е.Д.¹
Учреждения:
1. Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии “Вектор” Роспотребнадзора
Выпуск: Том 59, № 2 (2023)
Страницы: 167-173
Раздел: Статьи
URL: https://permmedjournal.ru/0555-1099/article/view/674632
DOI: https://doi.org/10.31857/S0555109923020174
EDN: https://elibrary.ru/LVLPXU
ID: 674632

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ
Доступ закрыт

Доступ предоставлен
Доступ закрыт

Только для подписчиков

Аннотация
Об авторах
Список литературы
Дополнительные файлы
Статистика

Аннотация

Сконструирован рекомбинантный штамм–продуцент интерферона гамма человека (ИФН-γ) E. coli BL 21/pЕТ-IFN-γ, обеспечивающий высокий уровень его экспрессии. Разработан способ получения растворимой формы рекомбинантного ИФН-γ, включающий наработку биомассы штамма-продуцента, содержащего целевой белок в количестве 32–37% от общего содержания клеточных белков, из которых 15–17% в растворимой форме, выделение и очистку белка. Процесс выделения и очистки включал стадии дезинтеграции, осветление лизата клеток, хроматографической очистки и диализа. Разработанный способ позволил получить из 1 г влажной биомассы до 5 мг препарата с чистотой не менее 95% и высокой специфической (противовирусной) активностью.

Ключевые слова

рекомбинантный интерферон гамма человека, штамм-продуцент, культивирование, хроматография, специфическая активность

Список литературы

Pandey R., Prabhu A.A., Dasu V.V. // Separation Science and Technology. 2018. V. 53. № 3. P. 487–495. https://doi.org/10.1080/01496395.2017.1395463
Razaghi A., Owens L., Heimann K. // J. Biotechnol. 2016. V. 240. P. 48–60. https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2016.10.022
Khalilzadeh R., Shojaosadati S.A., Bahrami A., Maghsoudi N. // Biotechnology Letters. 2003. V. 25. № 23. P. 1989–1992. https://doi.org/10.1023/b:bile.0000004390.98648.25
Rosano G.L., Ceccarelli E.A. // Front. Microbiol. 2014. V. 5. P. 172. https://doi.org/10.3389/fmicb.2014.00172
Malhotra A. // Methods in Enzymol. 2009. V. 463. P. 239–258. https://doi.org/10.1016/S0076-6879(09)63016-0
Leibly D.J., Nguyen T.N., Kao L.T., Hewitt S.N., Barrett L.K., Van Voorhis W.C. // PlOS ONE. 2012. V. 7. №. 12. P. e52482. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0052482
Tileva M., Krachmarova E., Ivanov I., Maskos K., Nacheva G. // Protein Expr. Purif. 2016. V. 117. P. 26–34. https://doi.org/10.1016/j.pep.2015.09.022
Государственная фармакопея РФ XIV изд. Т.2. ОФС.1.7.2.0002.15 Биологические методы испытания препаратов интерферона с использованием культур клеток. С. 2740–2749. https://femb.ru/record/pharmacopea14
Хайруллин Р.Ф. Экспрессия рекомбинантных белков в E. coli: учебн. пособие. / Ред. Р.Ф. Хайруллин, Р.Г. Киямова, А.А. Ризванов. Казань: Изд-во Казанского ун-та, 2018. 142 с.
Закабунин А.И., Барановская Г.А., Пустошилова Н.М., Майстренко В.Ф., Гаврюченкова Л.П., Громова О.А. Способ получения рекомбинантного интерферона – гамма человека. Патент РФ. 1999. № 2132386.