Changed content of heat shock proteins and antibodies to them in blood and nasal mucosa cells in rhinites and rhinosinusites of different etiology

M. O. Ivanov; Иванов М. О.; N. M. Ivanova; Иванова Н. М.; M. V. Maksimenya; Максименя М. В.; T. M. Karavaeva; Караваева Т. М.; E. V. Egorova; Егорова Е. В.; E. V. Fefelova; Фефелова Е. В.; N. N. Tsybikov; Цыбиков Н. Н.

doi:10.17816/pmj35623-28

Изменение содержания белков теплового шока и антител к ним в крови и в клетках слизистой оболочки носа при ринитах и риносинуситах различной этиологии

Авторы: Иванов М.О.¹, Иванова Н.М.¹, Максименя М.В.¹, Караваева Т.М.¹, Егорова Е.В.¹, Фефелова Е.В.¹, Цыбиков Н.Н.¹
Учреждения:
1. Читинская государственная медицинская академия
Выпуск: Том 35, № 6 (2018)
Страницы: 23-28
Раздел: Методы диагностики и технологии
Статья получена: 15.10.2018
Статья опубликована: 30.12.2018
URL: https://permmedjournal.ru/PMJ/article/view/10344
DOI: https://doi.org/10.17816/pmj35623-28
ID: 10344

Цитировать

Полный текст

Аннотация
Полный текст
Об авторах
Список литературы
Дополнительные файлы
Статистика

Аннотация

Цель. Определение содержания белка теплового шока с молекулярной массой 70 кДа (БТШ 70) и антител к ним в крови и назальном секрете у пациентов с аллергическими ринитами и инфекционными риносинуситами различной этиологии.

Материалы и методы. В работе представлены результаты обследования 10 пациентов с аллергическими ринитами и 30 больных инфекционными риносинуситами в возрасте от 25 до 35 лет. Пациенты с инфекционными риносинуситами были разделены на три группы согласно нозологической форме заболевания. В контрольную группу вошли 10 практически здоровых людей, сопоставимых по полу и возрасту с больными.

Результаты. Анализ показал, что в назальном секрете у всех пациентов значительно повышался уровень БТШ 70 по сравнению с группой контроля. Максимальные значения регистрировались при бактериальном риносинусите и были выше, чем у пациентов с вирусным и грибковым, в 1,9 (р = 0,015) и 2,9 раза (р = 0,001) соответственно. В сыворотке крови концентрация БТШ 70 в сравнении с контролем увеличивалась у пациентов с аллергическим ринитом и бактериальным риносинуситом на 103,67 % (р = 0,015) и 32,11 % (p = 0,049) соответственно, при этом значения данного показателя в последних двух группах превышали таковые у больных грибковым риносинуситом в 2,37 (р = 0,01) и 1,54 раза (p = 0,035).

Выводы. Выявлено, что в группе пациентов с аллергическим ринитом и хроническим бактериальным риносинуситом в назальном секрете и сыворотке крови наибольшее значения БТШ 70, причем в назальном секрете уровень БТШ 70 выше, чем в крови. Количество аутоантител к БТШ 70 в крови увеличивается при аллергических ринитах, при грибковых и вирусных формах риносинуситов, что отражает иммунологический эффект белков-шаперонов.

Ключевые слова

ринит, риносинусит, белок теплового шока, БТШ 70, аллергический риносинусит

Полный текст

Введение

В последние годы отмечен значительный рост распространенности заболевания слизистой оболочки носа (риниты) и околоносовых пазух (риносинуситы) [9]. Данные патологии чаще всего характеризуются синдромом, который включает заложенность носа, ринорею, приступы чихания, головную боль и другие, что отрицательно сказывается на социальных, физических и психических аспектах жизни человека [1]. Проблема патогенетической терапии этих состояний занимает особое место в современной ринологии, что объясняется недостаточной эффективностью лечения и высокой частотой рецидивов. Раскрытие новых звеньев патогенеза ринитов и риносинуситов позволит расширить перспективы открытия новых путей терапии данных заболеваний.

Являясь стресс-лимитирующими факторами, шапероны, или белки теплового шока (БТШ), активно синтезируются при многих патологических состояниях. Выявлено, что их концентрация в крови существенно увеличивается при хронических воспалительных процессах [2, 8].

Доказано, что БТШ экспрессируются как в клетках слизистой носа, так и в микроорганизмах [7, 10]. Данные вещества участвуют в разнообразных клеточных функциях, таких как сборка и фолдинг макромолекулярных комплексов, транспортировка и сортировка протеинов, диссоциация денатурированных агрегатов белка, контроль клеточного цикла и запрограммированной гибели клеток. Кроме того, являясь эволюционно стабильными и, как следствие этого, обладая высокой антигенностью, они способны стимулировать врожденный и приобретенный иммунитет [4].

Однако работы по выявлению роли БТШ в механизмах формирования местной резистентности, их участия в развитии патологического процесса в полости носа и носовых пазухах весьма немногочисленны [3].

Целью данного исследования было изучение содержания БТШ 70 и антител к ним в крови и назальном секрете у пациентов с аллергическими ринитами и инфекционными риносинуситами различной этиологии.

Материалы и методы исследования

В работе представлены результаты обследования 10 пациентов с аллергическими ринитами и 30 больных инфекционными риносинуситами, находившихся на лечении в оториноларингологических отделениях НУЗ «Дорожная клиническая больница» и ГУЗ «Городская клиническая больница № 1» г. Читы с 2012 по 2016 г. Возраст больных – от 25 до 35 лет. Пациенты с инфекционными риносинуситами были разделены на три группы согласно нозологической форме заболевания: 1-я группа – 10 человек с острым вирусным риносинуситом; 2-я группа – 10 человек с обострением хронического гнойного риносинусита; 3-я группа – 10 человек с хроническим риносинуситом грибковой этиологии. В контрольную группу вошли 10 практически здоровых людей, сопоставимых по полу и возрасту с больными. Все участники предоставили информированное согласие на участие в исследовании.

Выявление причины развития синусита осуществляли следующим образом: вирусный – на основании сроков заболевания не более 10 дней и ДНК-диагностики конкретного возбудителя, бактериальный – на основании бактериологического исследования, грибковый – по данным компьютерной томографии придаточных пазух носа и микробиологического культурального исследования. Диагностику аллергического ринита проводили по определению специфического антигена класса IgЕ (sIgE). Для постановки диагноза при каждой нозологической форме опирались на данные эндоскопического исследования и анамнез заболевания.

Оценку клинической картины течения заболевания производили методом анкетирования.

У обследуемых забирали кровь из вены. В сыворотке крови всех обследуемых определяли количество белка БТШ 70 и антитела к БТШ 70 методом ИФА, применяя наборы реактивов Enzo Life Science (США). Кроме того, уровень БТШ 70 оценивали в назальном секрете, полученном путем введения в полость носа сухой марлевой турунды, которую извлекали через 10 минут и помещали в пробирку с 0,9%-ным натрия хлоридом, затем тщательно отжимали. Стандартизация образцов осуществлялась по уровню белка, определяемого методом спектрофотометрии при длине волны 280 нм. Далее 3 мл полученной жидкости центрифугировали и хранили при –70 ºС.

Расчет полученных данных проводили с помощью программы Microsoft Excel. Описательная статистика представлена медианой и межквартильным интервалом (25-й; 75-й перцентили); для сравнения двух независимых выборочных совокупностей применяли критерий Манна – Уитни. Статистически достоверными считались различия при значениях р < 0,05.

Результаты и их обсуждение

Анализ показал (таблица), что в назальном секрете у всех пациентов значительно повышался уровень БТШ 70 по сравнению с контролем: при аллергическом рините в 4,9 (р < 0,001), при вирусном риносинусите – в 3,1 (р < 0,001), при бактериальном – в 5,9 (р < 0,001), при грибковом – в 2,0 раза (р < 0,001). Максимальные значения регистрировались при бактериальном риносинусите и были выше, чем у пациентов с вирусным и грибковым в 1,9 (р = 0,015) и 2,9 раза (р = 0,001) соответственно. При аллергическом рините цифры также были высокими и превышали таковые при грибковом риносинусите в 2,4 раза (р = 0,001). В исследованиях H.J. Min и соавт. (2016, 2017) также отмечено увеличение содержания данного белка в назальном секрете при аллергических ринитах [5, 6] и хронических полипозных риносинуситах [5, 10].

В сыворотке крови концентрация БТШ 70 в сравнении с контролем увеличивалась у пациентов с аллергическим ринитом и бактериальным риносинуситом на 103,67 (р = = 0,015) и 32,11 % (p = 0,049) соответственно, при этом значения данного показателя последних двух группах превышали таковые у больных грибковым риносинуситом в 2,37 (р = 0,01) и 1,54 раза (p = 0,035).

Вероятно, повышение БТШ 70 как в сыворотке крови, так и назальном секрете при аллергических ринитах и при инфекционных риносинуситах связано с гиперпродукцией БТШ 70 как фагоцитирующими клетками организма человека, так и микроорганизмами. Можно предположить, что в формировании белков теплового шока принимают участие множество клеток в очаге воспаления: эндотелиоциты, эпителиальные, и клетки соединительной ткани, и другие вовлекаемые в патологические процессы.

Уровень БТШ 70 и антител к нему в сыворотке крови и назальном секрете при аллергическом рините и риносинуситах различной этиологии (Me (25-й; 75-й))

Параметр, нг/мл

Контроль

(n = 10)

Аллергический ринит

(n = 10)

Вирусный риносинусит (n = 10)

Бактериальный риносинусит

(n = 10)

Грибковый

риносинусит

(n = 10)

БТШ 70 в секрете

30,96

(20,25; 41,46)

152,55*

(71,65; 223,95)

96,97*

(63,74; 115,27)

183,19*

(81,88; 294,29)

р₂ = 0,015

62,51*

(35,72; 104,11)

р₁ = 0,001

р₃ = 0,001

БТШ 70 в крови

3,27

(3,07; 3,34)

6,66*

(5,23;13,36)

3,64

(3,18; 4,30)

4,32*

(2,92; 6,11)

2,81

(2,44; 4,04)

р₁ = 0,035

Антитела к БТШ 70 в крови

278,51

(254,14; 436,53)

509,43*

(287,56; 625,53)

599,39*

(421,61; 808,36)

439,55

(314,75; 648,75)

787,42*

(582,28; 919,64)

Примечание: * – достоверные различия с контрольными результатами; р₁ – уровень значимости различий по сравнению с аллергическим ринитом; р₂ – по сравнению с вирусным риносинуситом; р₃ – по сравнению с бактериальным риносинуситом.

Стресс-белки обладают не только защитными свойствами, они могут являться одними из звеньев патогенеза ринитов и риносинуситов, так как, будучи высокоиммуногенными, способны индуцировать выработку аутоантител [4, 5, 8].

В нашем исследовании при бактериальных риносинуситах накопления аутоантител к БТШ 70 в крови не наблюдалось, что, возможно, свидетельствует о сбалансированности иммунного ответа при этом патологическом процессе. В то же время концентрация аутоантител к БТШ 70 в группе пациентов с аллергическим ринитом была выше в 1,83 раза (p = 0,049), в группе с вирусным риносинуситом – в 2,15 (p = 0,043), а в группе с грибковым – в 2,83 раза (p = 0,04) по сравнению с контрольными результатами.