ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НЕЙРОМЕДИАТОРА СЕРОТОНИНА И НЕЙРОНСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ЕНОЛАЗЫ В ОСТРОМ ПЕРИОДЕ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА

Полный текст

Введение Инфекционные поражения центральной нервной системы (ЦНС) характеризуются тяжестью течения, высокой летальностью, частым органическим поражением головного мозга с развитием резидуальной интеллектуальной недостаточности. В дальнейшем, снижая качество жизни человека, данная патология приобретает важное социальное значение [9]. В структуре нейроинфекций значительную долю занимает клещевой энцефалит (КЭ). Анализ заболеваемости КЭ, проводимый в отдельных субъектах Российской Федерации, свидетельствует о ее высоких показателях в Западно-Сибирском, Восточно-Сибирс-ком и Уральском регионах [1-3]. Патогенетические механизмы поражения ЦНС при КЭ, в основе которых лежит нарушение целостности гематоэнцефалического барьера (ГЭБ), обусловлены как особенностями возбудителя, так и ответными патофизиологическими реакциями организма [1, 8, 9]. При этом проявления КЭ в первые дни заболевания не определяют клинической формы и степени тяжести поражения ЦНС [7]. Оценка неврологического статуса носит субъективный характер. Исследование состава ликвора стандартными методами (цитоз, общий белок) позволяет диагностировать лишь наличие нейроинфекционного процесса, однако не выявляет связи между изменением этих показателей и степенью развития воспаления в ЦНС. В связи с этим для улучшения диагностики и результатов лечения необходима ранняя и объективная оценка тяжести поражения оболочек и ткани мозга [1]. В настоящее время одним из наиболее специфичных маркеров повреждения нейронов и, опосредованно, индикатором проницаемости ГЭБ признана нейронспецифическая енолаза (НСЕ) [1, 4, 5]. НСЕ, или 2-фосфо-D-глицерат-гидролиаза, - внутриклеточный гликолитический фермент ЦНС, который присутствует в нейронах головного мозга и периферической нервной ткани, имеет молекулярную массу 78 кДа и существует в виде нескольких димерных изоферментов (αα, αβ, ββ, αγ, γγ). Диагностически значимыми являются ее гомологичные γγ или гетерологичные αγ изоферменты. С помощью моноклональных антител, образующихся к γ-мономеру, этот антиген выявляется только в дифференцированных нейронах, что позволяет рассматривать НСЕ в качестве высокоспецифического маркера [4, 5, 9, 10]. Кроме того, существенным звеном в реакции головного мозга на повреждение является изменение метаболизма нейромедиаторов, в том числе серотонина. Известно, что серотонинергическая нейромедиаторная система - одна из активно функционирующих нейротрансмиттерных систем, обеспечивающих множественные физиологические эффекты в организме [5, 6]. Она активно включается в патогенетические процессы при различных заболеваниях нервной системы: эпилепсии, паркинсонизме, рассеянном склерозе, инсульте, мигрени, черепно-мозговой травме, мышечной дистонии [7-9]. Аналогом серотонинергического нейрона по ряду морфологических, цитологических, биохимических и фармакологических характеристик является тромбоцит [14]. Он находится за пределами ЦНС, в кровеносном русле, и поэтому может служить удобной периферической моделью серотонинергического синапса. Таким образом, приведенные данные позволяют рассматривать енолазу и тромбоцитарный серотонин (ТС) в качестве наиболее специфичных маркеров повреждения нейронов. Существование различных клинических форм КЭ (паралитической и непаралитической) диктует необходимость раннего выявления прогрессирования инфекции, чему, вероятно, будет способствовать исследование данных показателей. Цель исследования - оценить информативность изменений НСЕ и ТС крови у больных с различными формами КЭ в остром периоде. Материалы и методы исследования На базе краевой клинической инфекционной больницы г. Перми обследовано 44 пациента с острым течением КЭ, их них 24 мужчины и 20 женщин в возрасте от 18 до 71 года (в среднем 44,3 ± 15,8 г.). Больные были разделены на две группы в зависимости от клинической формы заболевания. Первая группа включала 35 пациентов с непаралитической формой КЭ (у 19 человек - лихорадочная форма, у 16 - менингеальная). Во вторую группу вошли 9 человек с паралитической (очаговой формой) КЭ. Контрольную группу составили 15 здоровых лиц. Диагноз КЭ устанавливался на основании эпидемиологических (присасывание клеща или посещение леса в сроки, соответствующие инкубационному периоду), клинических (наличие интоксикационного, менингеального, очагового синдромов) и серологических данных (обнаружение в сыворотке крови специфических IgM к антигену вируса клещевого энцефалита). Концентрации ТС и ТСЕ крови определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием набора Serotonin ELISA Fast Track (LDN, Германия) и набора реагентов «НСЕ-ИФА-Бест». Исследование проводилось в строгом соответствии с инструкцией в динамике заболевания: в периоды разгара (первые 2-4 дня болезни) и ранней реконвалесценции. Статистический анализ выполнялся на основании программы Statistica 6.0 (StatSoft Inc, USA) с применением способов непараметрической статистики. Результаты исследования выражали в виде среднего значения и его стандартного отклонения (M ± σ). Выявление статистически значимых различий выборок по количественным показателям в независимых группах проводили с помощью U-критерия Манна-Уитни, в зависимых - по критерию Вилкоксона, различия считали значимыми при р < 0,05. Для исследования взаимосвязи признаков использовали корреляционный анализ Спирмена. Результаты и их обсуждение Исследование количественного содержания серотонина тромбоцитов крови у всех больных в остром периоде КЭ, независимо от клинической формы, выявило его достоверное уменьшение относительно контрольных значений. Так, средний уровень ТС при КЭ в целом составил 203,7 ± 107,1 нг/мл, а в группе контроля - 585,4 ± 258,8 нг/мл (р < 0,05). Анализ концентрации ТС при различных формах болезни позволил установить более низкий показатель при паралитической форме (111,8 ± 40,1 нг/мл), чем при непаралитической (237,1 ± 97,7 нг/мл, р < 0,05) (рис. а). При сравнении значений ТС имело место достоверное различие между очаговой и лихорадочной (р < 0,05), очаговой и менингеальной формами (р < 0,05). Концентрации ТС при лихорадочной и менингеальной формах колебались в одних и тех же пределах, составляя соответственно 230,9 ± 99,9 и 245,45 ± 98,9 нг/мл (р > 0,05), но были значительно (в 2 раза) ниже, чем у здоровых лиц. В период ранней реконвалесценции уровень ТС в группе больных КЭ в целом повышался до 281,6 ± 138,2 нг/мл, но оставался в два раза ниже, чем в группе контроля (р < 0,05). На основании более детального исследования установлено, что при паралитической форме показатель ТС достоверно не изменялся, составляя 128,0 ± 30,9 нг/мл (р > 0,05), что в 5 раз ниже контрольных значений; при непаралитической форме он увеличивался до 319,8 ± 127,3 нг/мл (р < 0,05), но был в 2 раза ниже, чем у здоровых лиц. Исследование уровня НСЕ крови у всех больных в остром периоде КЭ, независимо от клинической формы, не выявило его отличия относительно контрольных значений. Он в целом составил 5,8 ± 2,2 нг/мл и не различался с данными группы контроля - 6,2 ± 0,8 нг/мл (р > 0,05). В первые дни болезни концентрация НСЕ в сыворотке крови у больных с паралитической формой КЭ составила 6,9 ± ± 2,0 нг/мл, при непаралитических формах: лихорадочной - 5,4 ± 1,5 нг/мл и менингеальной - 5,7 ± 1,7 нг/мл (рис. б). Достоверных различий между полученными результатами и величиной енолазы в контрольной группе не было (р > 0,05). 1.tif Рис. Содержание ТС (а) и НСЕ (б) у больных паралитической и непаралитической формами в динамике острого периода КЭ В период ранней реконвалесценции содержание НСЕ у больных КЭ в целом повышалось до 6,9 ± 2,9 нг/мл (р < 0,05), но не отличалось от показателя в группе контроля (р > 0,05). В динамике течения инфекционного процесса у всех пациентов с непаралитическими формами достоверных изменений НСЕ не установлено - 5,4 ± 1,2 нг/мл (р > 0,05). В период ранней реконвалесценции при лихорадочной форме уровень НСЕ составил 7,2 ± 1,7 нг/мл, при менингеальной - 6,3 ± ± 2,5 нг/мл (р > 0,05). Вместе с тем при паралитической форме выявлено достоверное (р < 0,05) увеличение концентрации НСЕ - 10,8 ± 1,9 нг/мл, свидетельствующее о развитии более выраженной патологии в ЦНС, сохраняющейся и в период регресса клинических проявлений. Значения НСЕ при непаралитических формах КЭ, не превысившие нормативных показателей, по-видимому, можно объяснить относительной доброкачественностью течения заболевания у обследуемых пациентов. С помощью корреляционного анализа установлена отрицательная связь между концентрациями НСЕ и ТС в разгар инфекции (r = -0,56, р < 0,05): чем выше уровень енолазы, тем ниже ТС. В период реконвалесценции корреляции между данными показателями не выявлено (r = -0,54, р > 0,05). Обнаружена связь изучаемых показателей с тяжестью течения КЭ: отрицательная с ТС в период разгара (r = -0,53, р < 0,01) и реконвалесценции (r = -0,65, р < 0,01), положительная с НСЕ в период реконвалесценции (r = 0,79, р < 0,001). В первые дни заболевания связи между енолазой и тяжестью процесса не определялось (r = 0,29, р > 0,05). На основании полученных данных нами установлено, что исследование концентрации ТС в период разгара инфекции в качестве маркера раннего распознавания поражения ЦНС при КЭ более информативно, чем определение уровня енолазы в сыворотке крови. Анализ содержания ТС у больных выявил достоверное снижение данного показателя относительно контрольных значений, причем при паралитической (очаговой) форме КЭ количественные показатели ТС были существенно ниже, чем при непаралитической (лихорадочной и менингеальной). Наличие достоверной разницы между тяжелой паралитической и менее тяжелой непаралитической формой КЭ в разгар болезни позволяет использовать данный показатель для оценки тяжести заболевания и дает возможность врачам-инфекционистам и неврологам уже в первые дни болезни спрогнозировать формирование паралитических (очаговых) форм, назначить адекватную терапию и уменьшить количество осложнений. Выводы Определение уровней НСЕ в сыворотке крови и ТС при КЭ является дополнительным критерием степени повреждения нейронов. Исследование концентрации ТС в остром периоде КЭ может служить ранним прогностическим маркером формирования паралитической (очаговой) формы. Применение методики определения величины ТС с помощью ИФА при КЭ повышает возможности интерпретации данного показателя и позволяет рекомендовать его для включения в план обследования больных в остром периоде заболевания с целью ранней диагностики тяжести течения.

Об авторах

Ольга Николаевна Сумливая

Пермский государственный медицинский университет им. академика Е.А. Вагнера

Email: son-2005@yandex.ru
кандидат медицинских наук, доцент кафедры инфекционных болезней

Список литературы

Дополнительные файлы