Генетические причины невынашивания беременности на ранних сроках у пациенток после вспомогательных репродуктивных технологий

Полный текст

Введение

Невынашивание беременности (НБ) является значимой медико-социальной проблемой, имеющий особое значение в аспекте неблагоприятной демографической ситуации в стране и регионе [1]. Частота НБ составляет от 10 до 25 % в популяции. От 50 до 70 % случаев данной патологии приходится на I триместр беременности [2]. К потере беременности на ранних сроках в значительной части случаев приводит нарушение генетической структуры кариотипа [1].  Среди причин, вызывающих генетически-обусловленное НБ, можно выделить две основные группы: генетические аномалии со стороны матери и патологический генотип плода.

К НБ со стороны матери приводят мутации в генах, играющих ключевую роль в обеспечении нормальной гестации [3]: гены, кодирующие гемостатическую функцию (обеспечение имплантации эмбриона) [8], гены иммунологической системы (обеспечение выживаемости полуаллогенного плода) [5, 6], гены эндотелиальной дисфункции [6], гены фолатного цикла (обеспечение активного роста и дифференцировки тканей эмбриона) [4], гены энергетического обмена, а также гены, кодирующие гормоны и их рецепторы [7].

Учитывая идентичность генотипа плода и плаценты, отклонение от нормальной структуры генотипа плода является фактором НБ по ряду причин: во-первых, аномальный кариотип может привести к формированию летальных пороков развития плода, что приводит к прерыванию беременности [15, 17, 20]. Во-вторых, генетические мутации могут нарушать структуру генов плаценты, обеспечивающих нормальное развитие беременности: гены, кодирующие ангиогенез, ремоделирование спиральных артерий, инвазию трофобласта [15].

Причинами генетических аномалий плода выступают сбалансированные структурные хромосомные перестройки родителей (5–7 % семей), приводящие к формированию патологических гамет [15, 16], и факторы внешней среды (экологические, инфекционные, токсические и др.), обусловливающие их случайные мутации [17, 18].

В настоящее время единственной возможностью родить здорового ребенка у таких семей является обращение к программам вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) [7, 8], однако даже при их использовании частота НБ составляет 30 % [11, 12], а доля хромосомных аномалий – 50–65 % [13]. Учитывая, что у пар, включенных в программы ВРТ, имеются факторы дополнительного риска для НБ, утверждение о роли ВРТ в увеличении риска развития хромосомных нарушений, распространенное в медицинских кругах, – сомнительно. В связи с этим представляется значимым анализ частоты встречаемости патологического кариотипа плода как при естественной беременности, так и после ВРТ.

Цель исследования – проанализировать частоту встречаемости патологического кариотипа при беременности, наступившей естественным путем, а также с помощью применения ВРТ.

Материалы и методы исследования

Проведено одноцентровое когортное ретроспективное сравнительное исследование данных кариотипирования абортивного материала от 256 женщин с диагнозом «неразвивающаяся беременность», с указанием возраста, срока гестации на момент прерывания беременности за период с 2018 по 2020 г. на базе АО «Центр семейной медицины», г. Екатеринбург.

Пациентки были распределены на две группы:

– 1-я группа (132 человека) – случаи нормального кариотипа абортуса (51,6 %);

– 2-я группа (124 человека) – случаи с аномальным кариотипом абортуса (48,4 %).

Критерии включения в исследование: наличие диагноза «неразвивающаяся беременность в сроке до 22 недель гестации», наличие результата кариотипа абортуса.

Критерии исключения из исследования: срок потери беременности свыше 22 недель гестации, отсутствие исследования кариотипа плодного яйца (эмбриона).

Также для проведения сравнительного анализа было выделено три группы в зависимости от способа наступления беременности:

I группа (n = 36) – беременность наступила естественным путем;

II группа (n = 149) – беременность наступила в результате ЭКО+ИКСИ;

III группа (n = 26) – беременность наступила в результате ЭКО+ИКСИ с донорскими клетками (яйцеклетка и / или сперматозоид).

Работа проведена в соответствии с этическими нормами, изложенными в Хельсинкской декларации (2013). Статистическая обработка исследуемых данных выполнена при помощи пакета программ для статистической обработки данных Statistica для Windows 10 и Microsoft Excel 2010. Проверку на нормальность распределения проводили по критерию Колмогорова – Смирнова. Распределение по возрасту и сроку гестации на момент аборта соответствует нормальному.

Для качественных показателей представлены абсолютные и относительные величины (%). Статистическая достоверность оценивалась по методу одностороннего критерия Стьюдента для двух долей. Для количественных показателей представлены средние значения со стандартной ошибкой среднего, стандартное отклонение. Статистическую значимость количественных показателей определяли с помощью t-критерия Стьюдента. Критический уровень достоверности нулевой статистической гипотезы равен 0,05.

Результаты и их обсуждение

Абортивный материал был получен от женщин в возрасте от 23 до 46 лет, средний возраст женщин составил 34,6 ± 0,27 г. В большинстве случаев возраст женщин находится в диапазоне 30,3–38,9 г. (s = 4,3). В группах с нормальным (n = 132) и патологическим (n = 124) кариотипом, средний возраст женщин составил 34,2 ± 0,38 и 35 ± 0,39 г. соответственно. Различия незначительны и статистически не значимы (p = 0,1337).

Нормальный кариотип был выявлен в 132 случаях, что составляет 51,6 %, оставшиеся 48,4 % приходятся на патологический кариотип (n = 124).

Среди аномалий кариотипа (случаи второй группы) наиболее часто встречались анеуплоидии – в 87,1 % случаев (n = 108): моносомии (n = 14), трисомии (n = 94). Оставшуюся часть в доле аномалий занимают полиплоидии, среди которых встречались кариотипы с трехкратным (n = 8) и четырехкратным (n = 2) набором хромосом.

Срок аборта был указан в 237 случаях. В исследуемой выборке аборт происходил от 3-й до 11-й недели гестации, в среднем на 6,05 ± 0,14 недели. В большинстве случаев аборт происходил в интервале от 3,8 до 8,2 недели гестации (σ = 2,2).

В группах с нормальным и патологическим кариотипом средний срок аборта составил 5,9 ± 0,19 и 6,2 ± 0,21 недели гестации соответственно. Различия незначительны и статистически не значимы (p = 0,2761).

В 215 случаях был указан способ наступления беременности: беременность, наступившая естественным путем, – 36 (16,7 %), беременность, наступившая с помощью ВРТ, – 179 (83,3 %). Из них у 149 женщин беременность наступила путем экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) с инъекцией сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки (ИКСИ) (83,2 %), у 26 женщин – ЭКО с ИКСИ с применением донорских клеток (14,5 %), у 2 – суррогатное материнство, у 2 – контролируемая индукция овуляции для дальнейшего естественного оплодотворения.

На основании способа наступления беременности были выделены три исследуемые группы, в которых осуществлен анализ частоты встречаемости нормальных и патологических кариотипов абортусов: I группа – кариотипы абортусов от беременностей, наступивших естественным путем (36 случаев), II группа – кариотипы абортусов от беременностей, наступивших путем ЭКО с ИКСИ с применением собственных клеток (149 случаев), III группа – кариотипы абортусов от беременностей, наступивших путем ЭКО с ИКСИ с применением донорских клеток (26 случаев) (таблица).

 

Частота встречаемости нормального и патологического кариотипа абортусов в исследуемых группах

Группа	Нормальный кариотип		Патологический кариотип
	абс.	%	абс.	%
I,  n = 36	13	36,1	23	63,9
II,  n  = 149	81	54,4	68	45,6*
III,  n  = 26	17	65,4	9	34,6**

П р и м е ч а н и е : * – различия между I и II группами статистически достоверны, p = 0,0495; ** – различия между I и III группами статистически достоверны, p = 0,0229.

 

В I группе частота встречаемости патологического кариотипа составила 63,9 % (n = 23), во II – 45,6 % (n = 68), в III – 34,6 % (n = 9).

Во II (45,6 %) и III (34,6 %) группах, где наступление беременности произошло с помощью методов ВРТ, аномалии кариотипа встречаются статистически реже в сравнении с I группой (63,9 %), p = 0,0495 и p = 0,0229 соответственно. Статистически значимых различий во встречаемости патологического кариотипа между II и III группами выявлено не было, p = 0,2962.

В большей степени проблема НБ, ассоциированная с патологическим кариотипом плода, возникает при беременности, наступившей естественным путем. Это может быть связано с отсутствием в ряде случаев прегравидарной подготовки при естественном наступлении беременности. Кроме того, при ВРТ, в особенности при ВРТ с применением донорского материала, заведомо происходит отбор клеток без аномалий кариотипа. Проблема же НБ после применения ВРТ может быть связана с другими факторами риска, соматическими или функциональными, которые имеются у пациенток.

С целью повышения репродуктивного здоровья населения может быть предложен такой перспективный метод, как генетический паспорт беременной, который будет включать в себя диагностическую панель вариантов определенных патологических полиморфизмов генов, играющих важную роль в нарушении детородной функции и бесплодии. Это позволит пациенткам, минуя несколько эпизодов НБ, истощающих организм матери, сразу обратиться к помощи ВРТ для профилактики НБ по поводу патологического кариотипа плода.

Выводы

1. Средний возраст женщин с диагнозом НБ с нормальным и аномальным кариотипом абортуса не отличается и составляет 34–35 лет.
2. Патологический кариотип абортуса наиболее часто встречается у пациенток с естественно наступившей беременностью (63,9 %), тогда как после ВРТ аномальный кариотип отмечается в 34–45 % случаев.
3. Таким образом, имеющиеся данные о возможных генетических причинах НБ на ранних сроках обращают внимание исследователей на необходимость проведения преимплантационного генетического тестирования для своевременной диагностики хромосомных аномалий плода.

Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Об авторах

Е. А. Росюк

Уральский государственный медицинский университет; Центр семейной медицины

Email: agorodnicheva99@gmail.com

кандидат медицинских наук, доцент кафедры акушерства и гинекологии

Россия, Екатеринбург; Екатеринбург

А. В. Городничева

Уральский государственный медицинский университет

Автор, ответственный за переписку.
Email: agorodnicheva99@gmail.com

студентка V курса

Россия, Екатеринбург

И. Л. Меньшикова

Уральский государственный медицинский университет

Email: agorodnicheva99@gmail.com

студентка V курса

Россия, Екатеринбург

Ю. А. Казанцев

Уральский государственный медицинский университет

Email: agorodnicheva99@gmail.com

студент V курса

Россия, Екатеринбург

А. Г. Шибаева

Центр семейной медицины

Email: agorodnicheva99@gmail.com

цитогенетик, заведующая цитогенетической лабораторией

Россия, Екатеринбург

Список литературы

Дополнительные файлы