Mycoplasma as one of causal factors of exacerbation of community-acquired pneumonia

Full Text

 Введение

Одним из важнейших направлений в системе военно-медицинской службы является разработка комплекса лечебно-профилактических мер, направленных на восстановление здоровья и боеспособности призывников-новобранцев, нарушенных или утраченных в связи с болезнью или травмой [1–4]. Несмотря на достижения в области диагностики и антибактериальной терапии, доля пневмонии в структуре заболеваемости достаточно велика как среди гражданского населения, так и военнослужащих [5, 6]. Основная цель клинических рекомендаций при этом – улучшение диагностических и фармакотерапевтических подходов к ведению пациентов с внебольничной пневмонией (ВП) в амбулаторной практике и стационаре [7–10].

В структуре респираторных заболеваний у новобранцев при формировании воинских коллективов следует выделить вспышки микоплазменной инфекции. Микоплазменная инфекция может протекать как синусит, фарингит, бронхит и пневмония. В современной литературе выделяются 16 типов плазмозов, из которых только 10 типов микоплазм участвуют в инфекционном воспалении в дыхательном тракте. Течение внебольничной пневмонии усугубляется хронизацией заболеваний верхних дыхательных путей [11, 12]. При этом призывники-военнослужащие могут быть инфицированы M. hominis, хламидийной респираторной врожденной инфекцией.

Микоплазмы – микроорганизмы, которые занимают промежуточное звено между бактериями, вирусами и грибами, характеризуются полиморфизмом и своеобразным жизненным циклом. Ведущим возбудителем при определенных заболеваниях бронхолегочной системы является М. pneumoniae (иногда их называют «атипичные пневмонии»). Инфекции дыхательных путей, вызванные вирулентным микроорганизмом микоплазмы, обладают высокой устойчивостью к антибиотикам, что обусловливает порой сложность и неадекватность проводимой антибактериальной терапии пневмонии [12–14].

Цель исследования – повышение эффективности лечения при обострении внебольничной пневмонии у новобранцев-военнослужащих с наличием хронических воспалительных процессов дыхательных путей.

Материалы и методы исследования

Проведен ретроспективный анализ архивного материала – историй болезни 266 больных пневмонией в возрасте 18–26 лет, находившихся на стационарном и амбулаторном лечении в Центральном военном госпитале г. Баку, Азербайджан.

У 22 больных, вновь поступивших в стационар, у которых ретроспективно в мокроте не выявлено колоний микроорганизмов, забиралась кровь для иммунологического анализа, проводимого в Центральной научно-исследовательской лаборатории Азербайджанского государственного института усовершенствования врачей им. А. Алиева.

Измерение антител IgМ-класса Mycoplasma hominis (ALPCO, США) было проведено на иммуноферментном аппарате BioScreen MS-500 (США). Метод основан на твердофазном иммуноферментном анализе.

Статистическая обработка осуществлялась с вычислением частоты встречаемости заболеваний (абсолютные показатели и соответствующие проценты).

Результаты и их обсуждение

В ретроспективном анализе историй болезней у 152 больных выявили сопутствующие заболевания органов дыхания с острым и хроническим течением, частота которых распределилась следующим образом:

– острый синусит – 43 (16,2 %);

– острые респираторные заболевания – 34 (12,8 %).

– бронхит – 16 (6,0 %);

– тонзиллит – 11 (4,1 %);

– средний отит – 2 (0,75 %);

– хронический синусит – 21 (7,9 %);

– хронический бронхит – 14 (5,3 %);

– частые острые респираторные заболевания – 7 (2,63 %).

– бронхоэктатическая болезнь – 4 (1,5 %).

Материал микробиологического исследования зарегистрирован в истории болезни у 118 обследованных до начала проведения антибактериальной терапии. По результатам проведенного микробиологического исследования индуцированной мокроты рост культуры обнаружен у 83 (70,3 %) пациентов, в 35 (29,7 %) случаях колоний микроорганизмов не выявлено. Спектр выделенных возбудителей в мокроте был представлен следующими штаммами:

– S. Pneumonia – 35(29,7 %);

– Candida spp. – 6 (5,1 %).

– S. Aureus – 5(4,2 %);

– Р. Aeruginosa – 3(2,5 %);

– Е. coli – 2(1,7 %);

– S. Marcenscens – 1(0,8 %).

Возбудитель не выявлен у 35 (29,7 %) больных.

Следует отметить, что в большинстве амбулаторий полные бактериологические анализы мокроты не выполняются по техническим причинам, а результаты посева мокроты на чувствительность выделенного возбудителя к антибактериальным препаратам врач получает не ранее чем через 48 ч после сбора. Практически недоступны в клинико-диагностической лаборатории новые иммунологическое и молекулярно-биологические исследования. В последние годы отмечается значительное расширение спектра возбудителей острой пневмонии, что вызывает существенное изменение клинического течения этого заболевания. Данные, полученные в России и в других странах, также вполне сопоставимы, хотя и были получены разными методами с помощью выявления возбудителя или его антигена в плевральном экссудате, в пунктатах легкого, а также антител к хламидиям, микоплазме и пневмококковых иммунных комплексов [15]. В наших наблюдениях анализ мокроты при ВП также выявил только S. Pneumonia, а штаммы Mycoplasma обнаружены не были, возможно, из-за вышеуказанных технических причин.

Пользуясь методом иммуноферментного анализа, проводили измерения в сыворотке крови антител IgM-класса к Mycoplasma hominis у 22 больных, поступивших в стационар с внебольничной пневмонией.

Набор для определения антител IgМ-класса к Mycoplasma hominis представляет собой микротитровальные лунки для твердофазного иммуноферментного анализа ELISA, поскольку твердую фазу покрывают антигеном Mycoplasma hominis.

Сыворотку крови больного разбавляют (сначала 1:50 с Sample Diluent, а потом еще 1:1 c Sorbent) и оставляют на 15 мин при комнатной температуре. Затем разбавленные образцы сыворотки крови и готовые к использованию контроли (Neq. Control, Pos. Control, Cut-off Control) пипетируют по 100 μl в лунки. Во время инкубации (60 мин при 20–25 °С) образуется комбинация иммобилизованных антигенов микоплазмы и хоминис-специфических антител.

После инкубации содержимое лунок удаляют, и каждая лунка прополаскивается 300 μl разведенного раствора Wash Solution (первая отмывка), чтобы удалить несвязанный материал образца и контроля.

Далее антитела класса IgМ, конъюгированные с пероксидазой хрена (Сonjugate), вводят по 100 μl в лунки. Во время второй инкубации (30 мин при 20–25 °С) этот конъюгат анти-IgМ специфически связывается с антителами IgМ, что приводит к образованию ферментсвязанных иммунных комплексов. После инкубации проводится вторая отмывка для удаления несвязавшегося материала.

Рис. Частота встречаемости в сыворотке крови у больных внебольничной пневмонией антител IgМ-класса Mycoplasma hominis, n (%)

 Вследствие встраивания иммунных комплексов, образованных при инкубации (15 мин при 20–25 °С) с субстратом TMB (Substrate Solution, 100 μl), появляется синее окрашивание. Синий цвет превращается в желтый при прекращении ферментативной реакции с помощью серной кислоты (Stop Solution, 100 μl). Интенсивность цвета прямо пропорциональна количеству Mycoplasma hominis-специфического IgM-антител в образце пациента. Абсорбцию считывают при 450 нм, используя планшет-ридер ELISA.

В результате более чем у половины больных – у 13 (59,1%) – был выявлен позитивный (+) ответ (позитив: ОП > 1,1 х СО, где ОП – оптическая плотность, СО – Сut off – согласно прилагаемой к набору инструкции), свидетельствующий о наличии IgМ к M.hominis (рисунок). У 6 (27,3 %) лиц выявлен негативный (-) ответ (негатив: ОП < 0,9 ∙ СО). У 3 (13,6 %) пациентов уровень антител показал сомнительную зону (0,9 ∙ СО ≤ ОП ≤ 1,1 ∙ СО).

Таким образом, результаты исследования показали, что у новобранцев-военнослужащих с внебольничной пневмонией в структуре причинных факторов обострения процесса особое место занимает Mycoplasma hominis.

Выводы

1. У новобранцев-военнослужащих с внебольничной пневмонией среди микоплазменной инфекции особое место занимает Mycoplasma hominis.
2. У этого контингента пациентов помимо микробиологического исследования мокроты целесообразно проводить иммунологические исследования, так как наличие в крови высокой частоты антител IgM-класса к Mycoplasma hominis дает возможность считать их предиктором внебольничной пневмонии.
3. Для повышения эффективности антибактериальной терапии внебольничной пневмонии у новобранцев-военнослужащих следует учитывать частоту встречаемости и прогностическую ценность антител IgM-класса к Mycoplasma hominis.
4. При внебольничной пневмонии у лиц с наличием в анамнезе данных о сопутствующих хронических респираторных заболеваниях следует определять антитела IgM-класса к Mycoplasma hominis.

About the authors

F. V. Shirinova

Author for correspondence.
Email: Shirinovafidan@mail.ru

adjunct, doctor

References

Supplementary files

Supplementary Files

Action

1. JATS XML

Download

2. Figure: Frequency of occurrence in blood serum of patients with community-acquired pneumonia of IgM antibodies Mycoplasma hominis, n (%)

Download (45KB)

Indexing metadata