Изучение ранозаживляющего действия 2-(адамантан- 1-ил)-2-гидразино-5-фенил-4-оксобутеноата натрия©

Полный текст

Введение

Известно, что гидразинопроизводные 5-арил-2,4-диоксобутановых кислот, в особенности имеющие в своей структуре адамантильный фрагмент, проявляют высокую биологическую активность в различных фармакологических тестах [1–3]. Выявленные закономерности строения синтезированных соединений и биологического действия на организм животных позволяют продолжить их изучение с целью успешного потенцирования эффектов и получения практически значимых результатов более широкого спектра активности. Например 4-R-2-[(адамантан-1-ил)-2-оксоэтилиден]гидразинил-4-оксобут-2-еноаты натрия, синтез которых показан в работе [4], обладают высокой противомикробной, гемостатической, анальгетической и противовоспалительной активностью вместе с низкой острой токсичностью [2, 4, 5]. Одним из перспективных направлений дальнейшей работы с этой группой веществ является изучение дополнительного фармакологического действия наиболее биологически активных соединений. Представляет несомненный практический интерес исследовать обнаруженное ранее вещество-«лидер» из класса водорастворимых гидразинопроизводных 2,4-диоксобутановых кислот с наиболее высокой анальгетической и противовоспалительной активностью на его ранозаживляющее действие в составе экспериментальной гидрофильной мазевой композиции.

Цель исследования – изучить ранозаживляющую активность синтезированного ранее соединения-«лидера»: 2-(адамантан-1-ил)-2-гидразино-5-фенил-4-оксобутеноата натрия, а также установить возможность его практического применения в лекарственной форме мази.

Материалы и методы исследования

Объектом исследования являлся синтезированный нами 2-{2-[2-(адамантан-1-ил)-2-оксоэтилиден]гидразинил}-4-оксо-4-фенилбут-2-еноат натрия (далее – соединение), показавший ранее высокое анальгетическое и противовоспалительное действие. Температуру плавления (разложения) соединения определяли на приборе ПТП-2 (Россия) по методу 1 Государственной Фармакопеи Российской Федерации XIV издания [6]. ИК-спектры записаны на приборе ФСМ-1201 (Россия) в виде пасты в вазелиновом масле. Спектры ЯМР 1Н данного вещества записаны на приборе Varian Mercury Plus (300 МГц), внутренний стандарт – ГМДС, растворитель ДМСО-d6.

Модельный образец мази изготавливали на 5%-ной гидрофильной основе, состоящей из порошка альгината натрия и воды очищенной. Альгинатную основу получали путём растворения 2,0 г альгината натрия в 38 мл воды очищенной, нагретой до 60 °С, при постоянном перемешивании. Соединение вводили в мазевую основу в концентрации 5 % по типу раствора. Так, для получения 10,0 г модельной мази, отвешивали 9,5 г альгинатной основы в ступку, растворяли в ней 0,5 г исследуемого вещества и гомогенизировали до образования однородной консистенции по правилам изготовления гомогенных мазей.

Влияние на заживление линейных асептических ран кожи изучали ранотензиометрическим методом [7]. Опыты проводили на белых нелинейных крысах массой 190–270 г. Содержание животных и порядок проведения экспериментов соответствовали правилам надлежащей лабораторной практики и требованиям этических стандартов. В асептических условиях под кратковременным эфирным наркозом фиксировали животное, выстригали шерсть на спине, производили два параллельных разреза кожи до подкожной клетчатки. Раны зашивали рядом узловых швов (шелк № 3) с расстоянием между стежками в 5 мм. Раны животных подопытных групп ежедневно обрабатывали 5%-ной мазью исследуемого вещества. В одной из контрольных групп обработку не производили, в другой контрольной группе раны обрабатывали мазевой альгинатной основой. Препаратом сравнения служила мазь «Левомеколь». В контрольные и опытные группы было включено по три животных, у каждого животного произведено по два разреза, таким образом, в каждой группе было получено по шесть результатов. На седьмые сутки после операции определяли силу разрыва рубца в опытных и контрольных группах с помощью специального прибора, разработанного С.М. Горбуновым и соавт. О ранозаживляющем действии соединения судили по изменению прочности послеоперационного рубца на разрыв по сравнению с контролем [8].

Результаты ранотензиометрических исследований обработаны статистически с определением критерия Стьюдента на компьютере с помощью лицензионных прикладных программ StatSoft Statistica 8.0. Данные представлены в виде выборочного среднего М, ошибки среднего m и достигнутого уровня значимости р. Минимальный уровень значимости различий принимали соответствующим р ≤ 0,05.

Результаты и их обсуждение

Синтез 2-{2-[2-(адамантан-1-ил)-2-оксоэтилиден]гидразинил}-4-оксо-4-фенилбут-2-еноата натрия, включая исходные производные, осуществляли по методике, описанной в работе [4]. Его структура доказана спектральными характеристиками, а полученные результаты согласуются с литературными данными.

Соединение-«лидер», обладающее высокой анальгетической и противовоспалительной активностью, далее подвергнуто изучению влияния на заживление линейных асептических ран кожи. Результаты представлены в таблице. Для выполнения эксперимента предварительно нами была изготовлена модельная 5%-ная мазь, где в качестве основы использовалась 5%-ная альгинатная (гидрофильная) основа. Так как соединение растворимо в воде, его вводили в мазевую основу по типу раствора с образованием гомогенной мази. В ходе исследования установлено, что альгинатная мазевая основа практически не оказывает ранозаживляющего действия на модели линейной раны (см. таблицу).

Выявлено, что экспериментальная 5%-ная мазевая композиция с соединением достоверно увеличивает прочность рубца на разрыв, по сравнению с контролем без обработки. При этом ранозаживляющее действие разработанной нами модельной мази сопоставимо с эффектом препарата сравнения – «Левомеколь». Следует отметить, что в процессе эксперимента по нанесению изучаемой мазевой композиции на рану животных наблюдалось образование альгинатной плёнки по мере высыхания основы, которая удерживала края раны, а также создавала механический барьер, предотвращающий попадание различных мелких частиц на раневую поверхность. Это также способствует ранозаживляющей активности исследованного соединения.

 

Характеристика ранозаживляющей активности экспериментальной мазевой композиции

Объект исследования	Сила разрыва рубца, г (М ± m)	р по сравнению с контролем
Контроль (без обработки)	489,16 ± 27,39	–
Контроль (мазевая 5%-ная альгинатная основа)	501,67 ± 40,24	0,25
Препарат сравнения (мазь «Левомеколь»)	548,33 ± 24,24	0,05
Модельная 5%-ная мазь (соединение + альгинатная основа)	554,17 ± 39,51	0,05

 

Выводы

Полученные экспериментальные результаты свидетельствуют о перспективности технологических и фармакологических исследований.

Выбранное вещество-«лидер» в составе модельной 5%-ной гидрофильной мази на основе альгината натрия проявляет выраженную биологическую активность и рекомендуется для дальнейшего изучения в качестве потенциальной фармацевтической субстанции, обладающей комплексным ранозаживляющим и противовоспалительным эффектом.

Об авторах

Александр Сергеевич Кузнецов

Пермская государственная фармацевтическая академия

Автор, ответственный за переписку.
Email: alexanderiv.88@mail.ru

кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры общей и органической химии

Россия, 614990 г. Пермь, ул. Полевая, 2

Наталья Алексеевна Пулина

Пермская государственная фармацевтическая академия

Email: pulina-nata@mail.ru

доктор фармацевтических наук, профессор, заведующая кафедрой фармацевтической технологии

Россия, 614990, Пермь, ул. Полевая, 2

Светлана Викторовна Чащина

Пермская государственная фармацевтическая академия

Email: physiology@list.ru

кандидат биологических наук, доцент кафедры физиологии

Россия, 614990, г. Пермь, ул. Полевая, 2

Список литературы

Дополнительные файлы